Accuris High Fidelity Hot Start Master Mix 2X, 200 reacciones | PCR alta fidelidad Hot Start (PR1001-HFHS-200)

Accuris High Fidelity Hot Start Master Mix es una formulación 2X Hot Start, diseñada para amplificar plantillas complejas y muestras ricas en inhibidores, con excelente sensibilidad en ensayos de bajo número de copias. Integra potenciadores propietarios, anticuerpos Hot Start y un componente con actividad de corrección (proofreading) para un armado de PCR más confiable. 🧬🔬

Beneficios clave

• Formulación 2X lista para usar en un solo tubo para facilitar el armado de reacciones. ✅
• Hot Start con anticuerpos para un ensamblaje de PCR sin complicaciones y mejor desempeño.
• Alta fidelidad con componente proofreading (actividad 3’→5’). 🧪
• Alta sensibilidad en PCR de low-copy y compatibilidad con ensayos de baja concentración.
• Apta para PCR larga, reportada hasta 10 Kb, y en presencia de inhibidores comunes de PCR. 🚀

Diseñada para plantillas complejas

• Compatibilidad amplia con ADN de distintas longitudes y niveles de complejidad.
• Recomendada para objetivos complejos y muestras con inhibidores.

Notas de resultado y aplicaciones

• El producto de PCR se describe como “sticky ended”.
• Útil cuando se requiere amplificación altamente precisa en aplicaciones de alta fidelidad (por ejemplo: clonación, mutagénesis, secuenciación y microarrays, según tu descripción de producto).

Almacenamiento

Al recibir, almacenar a -20 °C y evitar ciclos excesivos de congelación/descongelación. Conserva su actividad por 12 meses desde la recepción; puede almacenarse a 4 °C hasta por un mes. ❄️

Limitaciones de uso y control de calidad

• Solo para investigación; no destinado para uso terapéutico o diagnóstico.
• Probado para actividad, sensibilidad y ausencia de contaminación por nucleasas; fabricado bajo sistema de gestión de calidad ISO 9001:2008.

Guías generales de uso

• La mezcla 2X incluye complejo de polimerasa, dNTPs, MgCl2 y potenciadores de PCR para simplificar la reacción.
• Plantilla: para ADN genómico complejo, 5 ng a 500 ng por reacción; no exceder 100 ng para cDNA o ADN plasmídico.
• Primers: concentración recomendada de 0.2 µM a 0.6 µM; se sugiere Tm aproximada de 60 °C.
• Temperatura de alineamiento: iniciar en 65 °C; si hay productos no específicos o smearing, incrementar en pasos de 2 °C o usar gradiente.
• Extensión: desempeño óptimo a 72 °C; se recomienda 30 s por Kb (para gDNA eucariota o cDNA).

Configuración de reacción (referencia 25 µL)

• Accuris HFHS Master Mix: 12.5 µL (1X final)
• Primer forward (10 µM): 1.0 µL (400 nM final)
• Primer reverse (10 µM): 1.0 µL (400 nM final)
• ADN plantilla: <100 ng cDNA, <500 ng genómico (variable)
• Agua grado PCR: ajustar a volumen

Ciclaje de PCR (rutina)

• Desnaturalización inicial: 95 °C por 1 a 2 min
• 25 a 40 ciclos: 95 °C 15 s; 57 °C a 67 °C 15 s; 72 °C 30 s por Kb
• La temperatura de alineamiento se determina por el usuario.