Accuris qMAX First Strand cDNA Synthesis Flex Kit, 50 reacciones | cDNA para qPCR con primers separados

Accuris qMAX First Strand cDNA Synthesis Flex Kit genera cDNA de alta calidad, listo para PCR y qPCR, usando una reverse transcriptase de alta capacidad derivada de MMLV con alta termoestabilidad y un inhibidor potente de RNasa. El buffer 5X optimizado favorece síntesis eficiente, rendimiento consistente y datos reproducibles con una amplia gama de fuentes de RNA. 🧬🔬

Beneficios clave

• Formato conveniente de 2 tubos para una configuración sencilla de la reacción. ✅
• Primers separados de oligo(dT) y random hexamers para mayor flexibilidad en el diseño del ensayo. 🧪
• Rango de entrada: 10 pg a 2 µg de RNA total (o 5 pg a 0.5 µg de mRNA purificado con oligo(dT)).
• Diseñado para transcripción a temperaturas más altas para aliviar problemas por estructura secundaria.
• Proporciona fragmentos consistentes de hasta 9 Kb de longitud (según condiciones y plantilla). 🚀

Componentes incluidos (presentación 50 reacciones)

• High Capacity Reverse Transcriptase (100 u/µL).
• Buffer 5X optimizado.
• Random Hexaprimer 20 µM.
• Oligo (dT) primer 20 µM.

Guías generales del buffer

• Buffer 5X formulado para el RT del kit y con niveles óptimos de dNTPs, 20 mM de MgCl2, estabilizadores y potenciadores; no se recomienda añadir aditivos adicionales. ⚙️

Condiciones generales de reacción (referencia)

• Preparar mezcla RNA/primer, calentar a 70 °C por 2 min y regresar a hielo para relajar estructura secundaria.
• Incubación: 42 °C por 60 min (45 °C cuando hay alta estructura secundaria o alto GC).
• Si se usan random hexamers: 25 °C por 10 min antes de 42 °C.
• Desnaturalización final: 70 °C por 10 min.

Uso del cDNA para qPCR

• Para una reacción de qPCR de 20 µL, se recomienda usar 2.0 a 4.0 µL del producto de síntesis de cDNA.
• Almacenamiento del cDNA: 4 °C hasta 1 semana o -20 °C a largo plazo. ❄️

Almacenamiento del kit

Al recibir, almacenar inmediatamente a -20 °C y evitar ciclos excesivos de congelación/descongelación; conserva actividad por 12 meses desde la recepción. ❄️

Limitaciones y control de calidad

• Solo para investigación; no destinado para uso terapéutico o diagnóstico.
• Reactivos probados para actividad, reproducibilidad, eficiencia, activación por calor, sensibilidad y ausencia de contaminación por nucleasas; fabricado bajo ISO 9001:2008.